投稿者：はっちん
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(2) トゲトゲ蛋白の測定に成功！
【参考文献】
1) George S, et al., Evidence for SARS-CoV-2 spike protein in the urine of COVID-19 patients. Kidney360, June, 2021.
1) COVID-19患者の尿中SARS-CoV-2スパイクタンパク質の証拠（元記事⇒ https://kidney360.asnjournals.org/content/2/6/924 ）
から一部を【抜粋】
▼ポイント
・抗原捕捉アッセイを用いて、S1タンパク質の重症急性呼吸器症候群(SARS-CoV-2)スパイクS1タンパク質を検出し、2019年にコロナウイルス病患者の尿中にタンパク質が存在することを発見しました(COVID-19)。
・さらに、COVID-19の成人患者の24%と21%が、それぞれ尿アルブミンとシスタチンCのレベルが高いことがわかりました。
・尿中のSARS-CoV-2スパイクタンパク質の存在は、COVID-19に起因する腎異常を示唆している。
▼要約
背景SARS-CoV-2感染は、2021年4月時点で全世界で1億3,300万人>に感染し、250万人>人が死亡しました。SARS-CoV-2に感染した大多数の人は無症候性であるため、感染の長期的な影響の可能性について大きな懸念が提起されている。
▼結果
我々の分析はさらに、NP-PCR+であった成人の24%と21%が、尿中にそれぞれ高レベルのアルブミンとシスタチンCを有することを示した。アルブミン尿症(クレアチニンの>0.3mg/mg)を有する個人の間で、尿中のアルブミンとスパイクタンパク質の間に統計的相関関係が見られる可能性がある。
▼結論
一緒に、我々のデータは、SARS-CoV-2に感染した4人のうちの1人がアルブミン尿症などの腎異常を発症することを示した。これらの知見の長期的な影響に関する意識が保証されています。
▼紹介
アメリカでは、ヒルシュらの研究(18)は、COVID-19患者の37%が入院中に急性腎臓感染症(AKI)を発症し、そのほとんどが機械的換気を行っていることを示した。しかし、Wangら(19)による別の研究では、確認されたCOVID-19患者116人(中国武漢市の人民病院)に対して、急性腎臓感染症(AKI)が珍しいこと、およびSARS-CoV-2感染がAKIをもたらさなかったり、慢性腎臓病(CKD)を悪化させたりしなかったことが判明した。COVID-19患者の腎異常に対するもう一つの徴候は、COVID-19患者から採取された尿サンプルのほぼ4分の3でSARS-CoV-2ヌクレオカプシドタンパク質を発見したDiaoら(未発表の観察)によって観察された。
本研究では、生物学的検体中のSARS-CoV-2スパイクタンパク質の存在を検出する抗原捕捉アッセイを開発した。このアッセイを用いて、SARS-CoV-2に対して陽性(NP-PCR+)および陰性(NP-PCR-2)であった鼻咽頭綿棒(NP-PCR-)のPCR結果を有する成人および小児からCOVID-19パンデミック中に採取された尿サンプル中の抗原の存在を評価した。我々の研究集団には、パンデミックの3〜5年前に採取された尿サンプルも含まれていた。我々の研究集団では、COVID-19の成人患者の25%が感染の過程で少なくとも1回は尿中にSARS-CoV-2 S1タンパク質を有していたことがわかった。尿タンパク質分析は、NP-PCR+個体の24%および21%で、アルブミンおよびシスタチンCの上昇を有するタンパク尿をさらに明らかにした。
▼尿中のスパイクタンパク質の存在は、血清中のウイルスタンパク質の増加レベルと相関しない
COVID-19患者からの尿サンプル中のSARS-CoV-2スパイクタンパク質の高レベルの存在が血清中の高レベルのタンパク質によるものであるかどうかを評価するために、Sを使用してCOVID-19患者38人のコホートから49種類の血清サンプルをスクリーニングしました。エリサ(48尿サンプル;N=38)。3人の4つのサンプルだけが、下のLOD(5 ng/ml)より上の血清中のスパイクタンパク質のレベルを示し、これらはいずれもCOVID-19患者からの尿サンプルに対して行われたELISAアッセイでは陽性ではなかった(図5)。これらのデータは、尿中の高レベルのスパイクタンパク質とタンパク質の血清濃度との間に相関関係がないことを示唆している。
▼議論
これは、COVID-19および無症候性個体の患者の尿中のスパイクタンパク質を検出する抗原捕捉アッセイを用いた最初の報告である。
私たちの尿コレクションの分析は、NP-PCR+であった患者の約25%が尿中のSARS-CoV-2スパイクタンパク質を流すことを明らかにしました。我々の研究で使用された他の尿サンプルのいずれも、SARS-CoV-2スパイクタンパク質の存在を示さなかった。また、SARS-CoV-2スパイクタンパク質の存在とBMI、年齢、性別、入院期間の交帯因子との間には相関関係はなかった。さらに、尿中のスパイクタンパク質の存在が、COVID-19患者の腎臓感染、傷害、または機能不全によるものであるかどうかを評価した。血清クレアチニン、FENa、FEUrea、またはシスタチンCを含む腎臓機能不全の尿およびマーカーにおけるSARS-CoV-2スパイクタンパク質の存在との間には相関関係は認められなかった。
しかし、我々は、尿中のSARS-CoV-2スパイクタンパク質のレベルがアルブミン尿症の患者においてより高いことを指摘した(図4B)。Chu-CoV(32)による2003年の研究では、SARS-CoV患者における急性腎臓感染症(AKI)の発症は、ウイルスの腎臓トロピズムではなく多臓器不全による可能性が高いことが示唆された。興味深いことに、尿サンプルのウェスタンブロット分析は、スパイクタンパク質のS1断片の予想サイズ(78.3kD)であったタンパク質断片の存在を示した(図3C)。また、さらなる断片を観察し、タンパク質分解を示唆した(図3C)。スパイクタンパク質とアルブミンの両方が分子質量>60kDを有することを考えると、それらの放出は同様の濾過異常の結果である可能性が高い(33)。
全体として、我々のデータは、COVID-19を有する一部の患者の尿サンプル中のスパイクタンパク質の存在は、依然として未知または予測されていない腎臓損傷を示している可能性があることを示唆している。特に、タンパク尿および微視的な血尿の存在は、COVID-19(19)のより大きな臨床的重症度と関連している。COVID-19における腎臓損傷の主な形態は、サイトカイン嵐またはショックに二次的である可能性のある急性尿管損傷であるようです。腎臓の直接ウイルス感染は、存在する場合、検死研究で指摘されるように、最も重篤な症例でのみ起こり得る(34⇓-36)。
この研究のもう一つの重要な発見は、NP-PCR+であったほとんどの個人の尿中のウイルスRNAの欠如である。NP-PCR+であった93人の患者のうち、尿中のウイルスRNAに陽性であったのは2人だけだった(約2%;図 3B)。これら2つの陽性個体(男性1人と女性1人)のうち、尿中のスパイクタンパク質とウイルスRNAの両方に陽性であったのは1人(女性)だけだった。これは、尿中に検出されたSARS-CoV-2スパイクタンパク質が、腎臓のウイルス感染ではなく、濾過異常の直接的な結果であることを示唆している。COVID-19患者のごく一部の患者の尿中のウイルスRNAの存在がウイルス脱落の結果であるか、または単に尿採取中の汚染によるものかにかかわらず、さらに解明される。しかし、入院中に同じ個体から異なる時間に採取された尿サンプルの分析では、尿中のウイルスRNA脱落と一致するウイルスRNA検出のパターンは示されていません。さらに重要なことは、尿サンプルが、一般的に、鼻咽頭または鼻綿棒サンプルを有するRT-qPCRに対する厳格な正確性検証またはマトリックス同等性の研究として通過していないことを排除することはできない。
▼確認
この原稿は以前 https://doi.org/10.1101/2021.01.27.21250637のMedRxiv に掲載されました。
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